問：普通干型透析袋使用前必須預(yù)處理嗎？具體步驟是什么？

答：必須預(yù)處理，多數(shù)普通干型透析袋帶甘油涂層，不處理會污染樣品。標(biāo)準(zhǔn)步驟為：第一步剪取 10 - 20cm 合適長度的透析袋；第二步在大量 2% 碳酸氫鈉與 1mmol/L EDTA（pH8.0）溶液中煮沸 10 分鐘；第三步用蒸餾水清洗；第四步再放入 1mmol/L EDTA（pH8.0）溶液煮沸 10 分鐘；最后冷卻后浸于溶液中 4℃保存，使用前再用蒸餾水沖洗干凈。實驗要求不高時，也可直接沸水煮 10 分鐘簡化處理。

問：裝樣時透析袋該預(yù)留多少空間，為什么？

答：需預(yù)留 1/3 - 1/2 的空間。因為透析過程中，袋外的水和緩沖液會因滲透壓進入袋內(nèi)，尤其含鹽量高的蛋白質(zhì)溶液透析過夜時，體積增加 50% 屬于正常情況，預(yù)留空間能避免透析袋被漲破。

問：如何選擇干型透析袋的截留分子量？

答：要以需保留的大分子和待去除的小分子分子量為依據(jù)。需分離的兩種物質(zhì)分子量比率至少為 25，且經(jīng)驗法則是選擇截留分子量約為待保留大分子分子量的一半，這樣能保證至少 90% 的大分子保留率，比如要保留分子量 14000 的蛋白，可選 7000D 的透析袋。

問：透析時透析液和樣品的體積比例多少合適？透析過程中需要更換透析液嗎？

答：透析液體積建議為樣品體積的 100 倍，例如 10 毫升樣品需用 1L 透析液。透析過程必須更換透析液，通常過夜透析至少更換 3 次，可在透析后 2 - 4 小時、6 - 8 小時和 10 - 14 小時更換，最后一次更換后還需繼續(xù)透析至少 2 小時；若樣品中污染物濃度高，需更頻繁更換透析液。

問：干型透析袋使用時對溫度有什么要求？

答：溫度取決于透析袋膜類型和樣品特性。再生纖維素材質(zhì)的干型透析袋可承受溫度最高達 60℃，纖維素材質(zhì)的則可達 37℃。設(shè)定溫度時既要滿足透析效率，也要避免高溫破壞樣品活性，比如透析蛋白樣品時，溫度不宜過高以防蛋白變性。

問：操作干型透析袋時為何要戴手套？

答：一方面，預(yù)處理后的透析袋已處于潔凈狀態(tài)，手套可避免手上的汗液、油脂、微生物等污染透析袋和袋內(nèi)樣品；另一方面，部分實驗樣品或透析液可能具有腐蝕性或毒性，手套也能起到保護操作人員的作用。

問：干型透析袋受潮后該如何保存？能否再次晾干保存？

答：受潮后不能晾干保存，否則會造成膜的孔隙結(jié)構(gòu)不可恢復(fù)的倒塌。應(yīng)將其浸泡在 0.05%-0.1% 疊氮鈉、1% 苯甲酸鈉、1% 甲醛或 1mmol/L EDTA 溶液中，置于 4℃環(huán)境保存。

問：哪些化學(xué)物質(zhì)會損壞干型透析袋，需特別避開？

答：多種化學(xué)物質(zhì)會不可逆破壞透析袋微孔，需避開。比如烴、鹵化烴、酮、酯、胺等有機溶劑；甲酸、乙酸及 5% 鹽酸等酸類；10% 苯酚、30% 雙氧水等。另外，甲醇、乙醇濃度小于 5% 時雖透析功能存在，但會改變截留分子量，也需謹(jǐn)慎使用。

問：如何檢查干型透析袋是否有破損？

答：裝樣前可做簡易檢漏。將透析袋一端用夾子夾緊，灌滿蒸餾水，再夾緊另一端，之后用手指適當(dāng)加壓，觀察袋體是否有漏水情況；也可裝入清水后浸泡在干凈容器中，靜置片刻，若容器內(nèi)出現(xiàn)水珠或水位上升，說明透析袋有破損。

問：未開封和已開封的干型透析袋分別該如何長期儲存？

答：未開封的干型透析袋可在室溫或 4℃條件下，放在聚乙烯袋中儲存；已開封未使用的需密封好以防干裂，同樣可室溫或 4℃保存。其保質(zhì)期通常為兩年，儲存時需避免接觸腐蝕性物質(zhì)和強光直射。