完整版來源：上海哈靈生物科技有限公司 本試劑盒（上海哈靈生物科技有限公司提供完整版說明）通過多肽底物結(jié)合光度法，在 IKKβ 抑制劑存在下，特異性檢測細胞裂解液、純化酶樣品中 IKKα 的激酶活性，適用于科研中 IKKα 定量分析及抑制劑 / 激活劑篩選。產(chǎn)品無菌即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定（完整版細節(jié)見上海哈靈生物科技有限公司資料）。 IKKα 是 NF-κB 通路關鍵激酶，參與炎癥、細胞增殖相關基因調(diào)控，其異常與多種疾病相關。本試劑盒（上海哈靈生物科技有限公司開發(fā)）基于 IKKα 磷酸化特異底物，結(jié)合 NADH 氧化的光度變化（340nm）實現(xiàn)定量檢測。 1.5mL/15mL 離心管、細胞刮脫棒、臺式離心機、比色皿 / 96 孔板、分光光度儀 / 酶標儀；抑制劑篩選需自備 IKKα 激酶。 -
培養(yǎng)細胞（1-5×10?）用清理液（Reagent A）洗滌、刮脫，離心后加裂解液（Reagent B）冰浴裂解，離心取上清，定量蛋白后備用（詳細操作見上海哈靈生物科技有限公司完整版說明書）。 -
背景對照：緩沖液（Reagent C）+ 酶促液（Reagent D）+ 反應液（Reagent E）+ 底物液（Reagent F）孵育后，加陰性液（Reagent G），340nm 測 0-5 分鐘吸光度變化。 -
樣品檢測：同背景對照操作，將陰性液替換為待測樣品，測吸光度變化（具體體積見上海哈靈生物科技有限公司完整版說明）。 參照 96 孔板操作流程，按標記加樣、孵育后檢測，抑制率計算方法見上海哈靈生物科技有限公司完整版說明書。 -
本產(chǎn)品可供 20 次操作，操作需戴手套； -
樣品須澄清，忌用磷酸緩沖液處理； -
加樣后 3 秒內(nèi)即刻測定，光度值降低表明有酶活性； -
活性單位定義：30℃、pH7.5 下，每分鐘氧化 1μmol NADH 所需酶量（完整版細節(jié)見上海哈靈生物科技有限公司）。 注：本說明書為簡化版，詳細操作參數(shù)、計算方法等請查閱上海哈靈生物科技有限公司提供的完整版說明書。 |
ELISA（酶免）試劑盒
人ELISA試劑盒
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