產(chǎn)品基礎(chǔ)信息

一、產(chǎn)品簡介

二、產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 即用型設(shè)計(jì)，隨取隨用，2-8°C條件下可穩(wěn)定保存1年以上，無需提前制備；

2. 省去程序凍存流程與程序降溫儀投入，直接放入-80°C超低溫冰箱即可，節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間與人力成本；

3. 細(xì)胞復(fù)蘇率可達(dá)90%以上，適配多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞凍存需求；

4. 無血清配方，批次間差異小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性更優(yōu)；

5. 可有效維持干細(xì)胞多向分化潛能，滿足特殊細(xì)胞培養(yǎng)研究需求；

6. 化學(xué)成分明確，無外源蛋白添加，既減少污染機(jī)會(huì)，又避免外源蛋白對細(xì)胞正常生長分化的干擾。

三、使用說明

（一）細(xì)胞凍存

1. 選取對數(shù)生長期細(xì)胞（匯合度約90%），凍存前24 h內(nèi)完成換液，收集細(xì)胞并制備成單細(xì)胞懸液（貼壁細(xì)胞需用胰酶消化），計(jì)數(shù)確保細(xì)胞活率>90%；

2. 將細(xì)胞懸液以1000 r/min離心5 min，棄去上清液；

3. 向細(xì)胞沉淀物中加入本品，輕輕吹打混勻，調(diào)整細(xì)胞密度至2-5×10?個(gè)/mL；

4. 按0.5 mL或1.0 mL/管的量，將細(xì)胞懸液分裝至無菌凍存管，擰緊管蓋并做好清晰標(biāo)記；

5. 直接將分裝完畢的凍存管移入-80°C超低溫冰箱，確保冰箱溫度穩(wěn)定；

6. 如需長期穩(wěn)定保存，可經(jīng)-80°C超低溫冰箱過夜（>16 h）凍存后，轉(zhuǎn)移至液氮罐中長期存放。

（二）細(xì)胞復(fù)蘇

1. 將水浴鍋預(yù)熱至37°C，佩戴一次性PE無菌手套，在無菌離心管中加入9 mL預(yù)熱好的無菌培養(yǎng)基；

2. 從液氮罐中取出凍存管，迅速放入PE手套中并浸入37°C水浴鍋，輕輕搖晃加速溶解，力爭1分鐘內(nèi)融解。        小貼士：若液氮罐與水浴鍋距離較遠(yuǎn)（步行超過1 min），需先將凍存管置于干冰上轉(zhuǎn)運(yùn)，避免溫度回升產(chǎn)生冰晶損傷細(xì)胞；凍存管裝入PE手套可預(yù)防污染，融解過程需快速高效，建議同步使用計(jì)時(shí)器；若1分鐘內(nèi)未融解，可能因凍存液量過多或搖晃力度不足，需及時(shí)調(diào)整。

3. 在超凈工作臺(tái)內(nèi)，將復(fù)蘇后的細(xì)胞液移入裝有新鮮培養(yǎng)基的離心管，以1200 rpm離心3 min，棄去上清；

4. 用對應(yīng)細(xì)胞的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種至無菌培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿，補(bǔ)充適宜量培養(yǎng)基后，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

四、產(chǎn)品穩(wěn)定性及保存條件

1. 本品需在2-8°C避光環(huán)境下保存，有效期1年；為保障凍存效果，嚴(yán)禁凍融本品，避免影響成分活性；

2. 請?jiān)诒Ｙ|(zhì)期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品請勿使用，以防降低細(xì)胞復(fù)蘇存活率。

五、注意事項(xiàng)

1. 本品經(jīng)3次0.22 μm過濾除菌處理，使用全程需嚴(yán)格無菌操作，杜絕污染；

2. 操作時(shí)請穿戴實(shí)驗(yàn)服及一次性手套，保障自身安全與健康；

3. 凍存管分裝完成后，減少室溫/4°C環(huán)境存放時(shí)間，盡快移入-80°C超低溫冰箱，且需確保冰箱溫度穩(wěn)定；

4. 凍存管蓋務(wù)必?cái)Q緊，防止液氮滲入，避免復(fù)蘇時(shí)發(fā)生凍存管炸裂；

5. 針對敏感細(xì)胞系、珍貴細(xì)胞系、原代細(xì)胞樣本凍存，建議使用前行1周以上的凍存測試，確認(rèn)無異常后再正式凍存；

6. 本品為語燕生物科研專用產(chǎn)品，僅用于科研實(shí)驗(yàn)，不可用于診斷、治療、臨床及其他非科研用途。