適用范圍

實驗原理

試劑盒組成

1. 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶

2. 酶標試劑 6ml×1瓶

3. 酶標包被板 12孔×8條

4. 樣品稀釋液 6ml×1瓶

5. 顯色劑A液 6ml×1瓶

6. 顯色劑B液 6ml×1瓶

7. 終止液 6ml×1瓶

8. 標準品（16U/L） 0.5ml×1瓶

9. 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶

10. 說明書 1份

11. 封板膜 2張

樣本要求

1. 樣本采集后應(yīng)盡快完成前處理，處理完成后優(yōu)先即刻開展實驗；無法立即實驗的樣本，可置于-20℃條件保存，避免反復(fù)凍融。

2. 本試劑盒不適用含NaN?的樣本，NaN?會抑制辣根過氧化物酶（HRP）活性，干擾檢測結(jié)果。

操作步驟

1. 標準品梯度稀釋

• 5號標準品 8U/L：150μl原倍標準品 + 150μl標準品稀釋液

• 4號標準品 4U/L：150μl 5號標準品 + 150μl標準品稀釋液

• 3號標準品 2U/L：150μl 4號標準品 + 150μl標準品稀釋液

• 2號標準品 1U/L：150μl 3號標準品 + 150μl標準品稀釋液

• 1號標準品 0.5U/L：150μl 2號標準品 + 150μl標準品稀釋液

2. 加樣

• 空白對照孔：不加入標準品、待測樣本及酶標試劑，其余操作與其余孔一致

• 標準品孔：每孔準確加入50μl對應(yīng)濃度標準品

• 待測樣本孔：先加入40μl樣品稀釋液，再加入10μl待測樣本，樣本最終稀釋倍數(shù)為5倍

3. 第一次溫育

4. 洗滌液配制

5. 第一次洗滌

6. 加酶標試劑

7. 第二次溫育

8. 第二次洗滌

9. 顯色

10. 反應(yīng)終止

11. 吸光度測定

結(jié)果計算

注意事項

1. 試劑盒從低溫冷藏環(huán)境取出后，需在室溫環(huán)境平衡1小時后再使用；酶標包被板開封后未使用完畢的板條，需及時裝入密封袋密封保存。

2. 濃縮洗滌液低溫存放可能出現(xiàn)結(jié)晶析出，稀釋時可水浴加溫助溶，處理后不影響檢測結(jié)果。

3. 實驗加樣需使用校準合格的加樣器具，控制單次加樣時長，減少操作誤差。

4. 每次實驗均需同步制備標準曲線，樣本檢測值超出線性范圍時，可先行稀釋后再檢測，結(jié)果計算時乘以對應(yīng)總稀釋倍數(shù)。

5. 封板膜為一次性使用用品，避免交叉污染；顯色底物需避光存放。

6. 實驗需嚴格按照本說明書流程操作，檢測結(jié)果以酶標儀實測讀數(shù)為準。

7. 實驗樣本、洗滌液及實驗廢棄物，需按實驗室相關(guān)規(guī)范處理。

8. 不同生產(chǎn)批號的試劑盒組分不可混用。

保存條件及有效期

1. 試劑盒保存條件：2-8℃低溫冷藏

2. 有效期：6個月