主要用途
真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧高質(zhì)熒光測定試劑是一種旨在通過透膜熒光染色劑氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯，在細(xì)胞氧化條件下，產(chǎn)生熒光，來定量檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧族的生成和增加的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種實(shí)驗(yàn)用真菌/酵母菌株細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧的分析?？梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、衰老和代謝等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡易，活體檢測，性能穩(wěn)定，滯留持久，熒光清晰。
技術(shù)背景
真菌/酵母細(xì)胞是一種低等單細(xì)胞真核生物，具有細(xì)胞生長快，易于培養(yǎng)，遺傳操作簡單明了等原核生物的特點(diǎn)。作為模式生物，它具有比較完備的基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制和表達(dá)產(chǎn)物的加工修飾能力，在分子遺傳學(xué)方面認(rèn)識(shí)早，先作為外源基因表達(dá)的細(xì)胞宿主。超氧自由基陰離子（superoxide radical；O2-）、*（hydrogen peroxide；H2O2）、羥自由基或氫氧基（hydroxyl radical；OH-）、過氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氫過氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、過氧亞硝基陰離子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、單線態(tài)氧氣（singlet oxygen）等細(xì)胞內(nèi)活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的產(chǎn)生和增多，將導(dǎo)致細(xì)胞衰老或凋亡。氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯（6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate, acetyl ester；CM－H2DCFDA）是取代二氯二氫熒光素二乙酯（2′,7′-dichlorodihydrofluorescin diacetate；DCFH-DA）的升級(jí)產(chǎn)品，一種*自由通過細(xì)胞膜，并在細(xì)胞內(nèi)長期滯留而不易外漏的染色劑。一旦被*、羥自由基或氫氧基、過氧化基、次氯酸等氧化，便產(chǎn)生熒光。據(jù)此測定細(xì)胞內(nèi)活性氧族的濃度。