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活體細(xì)胞線粒體膜通道孔(MPTP)紅色熒光(TMRM)檢測(cè)

點(diǎn)擊次數(shù):1716 發(fā)布時(shí)間:2015/4/16
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主要用途


 活體細(xì)胞線粒體膜通道孔(MPTP)紅色熒光(TMRM)檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)四甲基羅丹明染料,選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,一旦釋放到細(xì)胞漿,即刻發(fā)生熒光淬滅,來(lái)分析和觀察線粒體膜通道孔活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞線粒體(動(dòng)物、人體、昆蟲(chóng)等)膜通道孔活性(開(kāi)放狀態(tài))的檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,活體檢測(cè),分辨率高,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。


技術(shù)背景


線粒體膜通道孔(mitochondrial permeability transition pore;MPTP)是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴性通道。在細(xì)胞凋亡或壞死時(shí),線粒體內(nèi)容物通過(guò)膜通道孔釋放到胞漿中。線粒體膜電位的去極化(depolarization),導(dǎo)致膜通道孔的開(kāi)放,顯著改變線粒體的通透性,使之線粒體膨脹(swelling),內(nèi)容物釋放。其中鈣離子過(guò)度進(jìn)入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開(kāi)放,而造成細(xì)胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。四甲基羅丹明(tetramethylrhodamine methyl ester;TMRM),為羅丹明衍生物陽(yáng)離子染料,作為電勢(shì)測(cè)定(potentiometric)熒光探針:*,具有親脂性的; 第二,與線粒體內(nèi)負(fù)電極結(jié)合而聚集;第三,容易進(jìn)入細(xì)胞及其線粒體。四甲基羅丹明進(jìn)入細(xì)胞后,被細(xì)胞內(nèi)酯酶切離,產(chǎn)生四甲基羅丹明。四甲基羅丹明進(jìn)入線粒體后,被線粒體俘獲,呈現(xiàn)強(qiáng)烈熒光。一旦線粒體膜通道孔開(kāi)放,四甲基羅丹明釋放出來(lái)而在胞漿重新分布,其熒光性顯著降低。線粒體內(nèi)熒光的變化,表明膜通道孔的開(kāi)放狀態(tài)。

 
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