主要用途 組氨酸標(biāo)記(His-tag)蛋白純化試劑是一種旨在通過氮川三乙酸鎳金屬親和樹脂的高度選擇性結(jié)合,進一步溫和洗脫,獲得非變性或天然的重組標(biāo)記目標(biāo)蛋白的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于融合或標(biāo)記在微小片段組氨酸上各種目標(biāo)蛋白的分離純化等。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作便捷,結(jié)合能力強(5-10毫克/次),回收純度和效率高達95%。 技術(shù)背景 研究編碼蛋白首先通過重組DNA技術(shù)在細菌中表達,并容易獲得純化的目標(biāo)蛋白。其中6 X 組氨酸標(biāo)記(Hexahistidine tagged fusion protein)蛋白系統(tǒng)有效地幫助獲得純化的目標(biāo)蛋白。6 X 組氨酸標(biāo)記系統(tǒng)與目標(biāo)蛋白在各種表達系統(tǒng),包括細菌、桿狀病毒和哺乳動物里融合表達,其作為標(biāo)記的組氨酸只有6個,在生理pH條件下不帶電荷,幾乎沒有免疫原性,對目標(biāo)蛋白的分泌、折疊、結(jié)構(gòu)和功能沒有影響??梢苑旁贜端或C端,能夠高度親和Ni離子(Nickel-nitrilotriacetic acid;Ni-NTA)達到天然或變性條件下進一步純化,從而得到滿意的表達產(chǎn)物。除了6 X 組氨酸標(biāo)記蛋白系統(tǒng),還有谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)融合蛋白系統(tǒng)、β-半乳糖苷酶融合蛋白、trpE融合蛋白、硫氫還原(Trx)融合蛋白系統(tǒng)等。
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